La moutarde de Dijon est faite à partir des graines de moutarde. Ces toutes petites graines (moins de 1 mm) sont écrasés et mises à fermenter dans du vinaigre (ou du verjus depuis 1752 et le dijonnais Jean Naigeon).
La moutarde de Dijon doit contenir plus de 28% en matière sèche de graine de moutarde.